Tirzepatide ialah agonis reseptor dwi novel yang menyasarkan kedua-dua GIP (peptida perencatan gastrik) dan GLP-1 (peptida-1 seperti glukagon), yang dibangunkan oleh Eli Lilly dan berjaya dipasarkan untuk rawatan sasaran diabetes, steatohepatitis tanpa alkohol (NASH) dan pengurusan berat badan kronik, dengan separuh hayat 116.7 jam. Berikutan kelulusannya untuk rawatan diabetes pada 2022, ia telah diluluskan selanjutnya untuk penurunan berat badan di Amerika Syarikat pada November 2023. Percubaan klinikal berskala besar melaporkan bahawa pesakit yang dirawat dengan ubat ini mencapai pengurangan berat badan maksimum sehingga 21%. Molekul itu terdiri daripada tulang belakang peptida yang terdiri daripada 39 asid amino dan rantai sampingan pada residu Lys20. Daripada 39 asid amino ini, 37 adalah semula jadi (atau dikodkan), manakala dua bukan semula jadi: sisa asid amino-isobutirik bukan pengekodan pada kedudukan 2 dan 13.
Untuk mencapai dua aktiviti, Tirzepatide bukan sahaja menggabungkan sisa asid amino yang diperoleh daripada GLP-1 dan GIP tetapi juga menggunakan beberapa residu asid amino yang unik. Struktur peptidanya terutamanya berasal daripada GLP-1, GIP, exenatide, dan semaglutide, dengan beberapa sisa yang tersendiri.
Dalam penyelidikan mengenai proses sintesis Tirzepatide, banyak kaedah telah digunakan untuk menghasilkan peptida sintetik. Pemilihan kaedah sintesis yang sesuai biasanya berdasarkan ciri molekul, seperti kehadiran asid amino bukan pengekodan, rantai sampingan bukan peptida, dan bilangan asid amino yang terlibat.
Bisintesis：Teknik rekombinan yang biasa digunakan untuk makromolekul (seperti antibodi monoklonal) juga boleh digunakan untuk peptida yang lebih kecil. Dalam pendekatan ini, DNA luaran diperkenalkan ke dalam Escherichia coli atau garisan sel mamalia (ovari hamster China, CHO), di mana peptida disintesis oleh sel. Walaupun garis masa pembangunan biasanya lebih panjang daripada kaedah sintesis konvensional, pendekatan ini telah berjaya digunakan untuk peptida semisintetik (cth., semaglutide, insulin degludec, dan liraglutide). Dua kelemahan kaedah ini ialah: (1) kesukaran untuk memperkenalkan asid amino yang tidak dikodkan oleh urutan DNA; dan (2) keperluan untuk pengubahsuaian sintetik selepas rekombinan untuk menggabungkan rantai sampingan bukan peptida.
ChemikSsintesis：
Sintesis peptida fasa pepejal (SPPS) telah terbukti berkesan untuk banyak peptida bersaiz sederhana (cth.,Lisinaptida danExenatide), termasuk yang disintesis menggunakan asid amino bukan pengekodan. Malangnya, untuk peptida yang lebih besar (biasanya> 30 asid amino), SPPS sering mengalami hasil proses yang rendah dan ketulenan yang lemah. Selain itu, disebabkan keperluan untuk beberapa operasi unit berturut-turut dilakukan tanpa ralat (dengan anggaran kadar kegagalan 20% untuk peptida melebihi 30 asid amino), ia membawa risiko pengeluaran yang ketara.
Sintesis peptida fasa cecair (LPPS). Kaedah ini adalah serupa dengan SPPS, dengan pengecualian bahawa peptida yang semakin meningkat tidak mengikat resin dan C-termininya adalah amida tidak reaktif atau ester yang dilindungi. Ia sangat sesuai untuk mensintesis peptida yang lebih kecil (≤10 asid amino), tetapi hasil dan ketulenan dengan cepat menurun apabila panjang peptida meningkat.
Kaedah hibrid SPPS/LPPS. Pendekatan ini menggunakan SPPS untuk menghasilkan serpihan peptida pendek ketulenan tinggi dan perantara kerpasan yang dicirikan dengan baik, dengan itu mengelakkan banyak risiko pembuatan dan isu ketulenan yang wujud dalam binaan SPPS yang lebih panjang. Selepas itu, serpihan yang dilindungi digandingkan dalam fasa cecair.
Kaedah hibrid SPPS/LPPS, yang menggabungkan kelebihan kedua-dua teknik, mewakili pendekatan yang sangat baik. Untuk melaksanakan strategi hibrid ini, serpihan yang sesuai yang disintesis melalui LPPS mesti dipilih terlebih dahulu. Pertimbangan utama dalam pemilihan serpihan termasuk panjang peptida, jumlah bilangan serpihan, identiti asid amino di tapak belahan, dan ciri rantai sisi. Saiz dan kuantiti serpihan adalah kritikal; manakala serpihan yang lebih kecil mungkin mencapai ketulenan yang tinggi, ia memerlukan proses pembuatan yang lebih kompleks yang melibatkan langkah LPPS tambahan. Sebaliknya, lebih sedikit serpihan besar mengenakan cabaran pengeluaran yang lebih besar dan menimbulkan risiko yang lebih tinggi untuk mencapai ketulenan yang tinggi. Selepas menilai faktor-faktor ini, penyelidik Eli Lilly memilih empat serpihan untuk sintesis tilitropine. Mengenai tapak belahan, pertimbangan penting ialah diastereomerisme asid amino terminal-C dalam setiap serpihan, kerana tulang belakang amida memudahkan diastereomerisasiα-stereocenter lebih mudah berbanding dengan asid amino yang dilindungi Fmoc yang digunakan dalam pembinaan SPPS. Berikutan penilaian meluas pelbagai serpihan, empat serpihan khusus akhirnya dipilih (Rajah 2–5). Keempat-empat serpihan telah disintesis melalui SPPS, mempamerkan kebolehpisahan mudah sebagai produk pepejal, dan mencapai tahap ketulenan yang sangat tinggi (97.5–99.5%).
Seterusnya, serpihan 2–5 digabungkan bersama melalui proses LPPS empat langkah.
Langkah 1: Sambungkan dua serpihan pertama, 2 dan 3, mewakili asid amino 30–39 dan 22–29, masing-masing. Sediakan penyelesaian berasingan serpihan 2 dan 3 dalam dimetil sulfoksida (DMSO) dan asetonitril (ACN), serta PyOxim dan diisopropiletilamin tulen dalam ACN, dan mengalirkannya bersama sebelum memasuki reaktor aliran palam (PFR) 27 untuk pencampuran dalam talian bagi memastikan keseragaman；
Langkah 2: Asid amino yang diperolehi 22–39 (Kompaun 6) kemudiannya digabungkan dengan Fragmen 4 untuk menghasilkan asid amino 15–39 (Kompaun 7)；
Langkah 3: Urutan asid amino yang diperolehi 15–39 (Kompaun 7) digandingkan dengan Fragmen 5 untuk menghasilkan tildropptide yang dilindungi Boc；
Langkah 4: Tanggalkan salutan pelindung untuk mendapatkan Tirzepatide.
Penapisan nano ialah teknologi berasaskan membran yang mengasingkan bahan terlarut dalam larutan berdasarkan berat molekul dan hidrofobisiti. Larutan tindak balas kasar melalui membran, menyingkirkan kekotoran berat molekul rendah seperti dibenzofurene (DBF), diethylamine (DEA), dan produk sampingan berkaitan PyOxim (PyO), sambil mengekalkan peptida sasaran. Memilih saiz liang yang sesuai adalah penting, memerlukan keseimbangan antara fluks rendah (untuk liang yang terlalu kecil) dan kehilangan peptida (untuk liang yang terlalu besar). Teknologi ini membolehkan pengeluaran berskala besar dengan prosedur operasi yang dipermudahkan dengan ketara.
Memandangkan Tirzepatide disintesis secara kimia semata-mata, terdapat banyak pengeluar yang menghasilkan bahan farmaseutikal aktif (API), mengakibatkan persaingan yang sengit. Pada masa ini, API bagi Tirzepatide dikilangkan di dalam negara oleh Hequan Pharmaceutical dan dieksport ke luar negara untuk penyediaan formulasi.
Rujukan：Org. Proses Res. Dev. 2021, 25, 1628−1636
Hubungi Kami:
PerluTirzepatideuntuk pembangunan API peptida, kelayakan standard rujukan, atau program biosimilar? Cosperpharm memberikan hasil yang tinggi‑ketulenan sintetik atau rekombinanTirzepatide dengan analisis lengkap HPLC, MS dan asid amino, serta dokumentasi kestabilan dan pengawalseliaan. Daripada miligram R&D kepada kilogram komersial, kami menawarkan bekalan fleksibel, harga telus dan sokongan teknikal untuk sintesis dan kawalan kekotoran. Hubungi kami melalui laman web atau e-mel kami– kami bertindak balas dalam masa 24 jam dengan petikan yang disesuaikan dan masa petunjuk yang realistik. Biarkan Cosperpharm menyokong projek Teriparatide anda dari makmal ke pasaran.
Telefon: +86-18986204913
Tel: +86-027-83338163
E-Mel: info@cosperpharma.com
-
