Kaedah Penyediaan Cagrilintide

Teknologi Latar Belakang

Cagrilintide ialah analog amylin tesilat bertindak panjang novel. Sebagai agonis bukan selektif reseptor amilin (AMYR) dan reseptor bergandingan protein kalsitonin G (CTR), ia adalah polipeptida kitaran yang terdiri daripada 38 asid amino. Urutannya mengandungi 38 asid amino dan sepasang ikatan disulfida. Cagrilintide boleh mengurangkan berat badan dan pengambilan makanan dengan ketara, dan mempunyai potensi dalam penyelidikan obesiti. Amylin ialah hormon lain yang berkaitan dengan rasa lapar dan kenyang di luar laluan isyarat GLP-1.

 

Cagrilintide boleh mengurangkan pengambilan tenaga, mengawal pilihan dan pilihan makanan, memberikan kesan pengawalan glukosa dengan dirembeskan bersama insulin, menghalang pembebasan glukagon selepas makan, dan melambatkan pengosongan gastrik. Ia mempunyai kelebihan yang jelas dalam rawatan diabetes, obesiti, sindrom metabolik, penyakit kardiovaskular dan aspek lain, dan mempunyai prospek permintaan dan aplikasi yang luas.

Formula Struktur Kimia Cagrilintide

 

 

Maklumat Asas

---

Nama Cina：卡格列肽

InggerisName：Cagrilintide

Nombor Syarikat：GT-F064

CAS：1415456-99-3

Sequence：γ-Glu-Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Arg-His-Ser-Ser-Asn-As n-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Pro-NH2(Disulfidebridge:cys4-cys9)

MolekularFormula：C₁₉₄H₃₁₂N₅₄O₅₉S₂

MolekularBerat badan：4409.01

 

Bahan mentah yang digunakan untukCagrilintide

 

Laluan Sintetik

---

Menurut paten yang berkaitan untuk cagrilintide, kaedah sintesis cagrilintide boleh diperolehi. Asid amino pada kedudukan 7-8 jujukan cagrilintide dipilih sebagai dipeptida pseudoprolin Fmoc-Ala-Thr(pro-me-me)-OH, asid amino pada kedudukan 10-11 jujukan sebagai pseudoproline dipeptide Fmoc-Ala-Thr(pro-me-me)-OH, asid amino pada kedudukan 10-11 jujukan sebagai pseudoproline dipeptide Fmoc-Ala-Thr(pro-me-me-me) asid amino jujukan sebagai dipeptida pseudoprolin Fmoc-Ser-Ser(pro-me-me)-OH; tindak balas gandingan dilakukan pada kedudukan yang tinggal mengikut urutan asid amino; resin peptida dibelah untuk mendapatkan cagrilintide linear; cagrilintide mentah kemudiannya diperolehi melalui kitaran fasa cecair, dan cagrilintide ditapis diperoleh melalui penyediaan penulenan, pemindahan garam, kepekatan, dan liofilisasi. Kaedah ini menggunakan tiga dipeptida pseudoproline untuk gandingan. Walaupun ia menyelesaikan masalah peningkatan kesukaran gandingan yang disebabkan oleh polikondensasi resin, ia meningkatkan kos pengeluaran, dan peptida halus yang diperolehi oleh proses ini mempunyai ketulenan yang agak rendah, yang gagal memenuhi keperluan kualiti untuk bahan farmaseutikal aktif.

Gambarajah Penyediaan Cagrilintide

 

(1)PenyediaanCagrilintideResin Peptida

Ambil 1.5 mmol asid amino terlindung pertama dan 1.5 mmol HOBT, larutkan dengan jumlah DMF yang sesuai dan sejuk hingga 0~15°C; ambil lagi 1.5 mmol DIC, perlahan-lahan tambahkannya ke dalam larutan DMF asid amino terlindung di bawah kacau, dan kacau tindak balas selama 10 minit pada 0~15°C untuk mendapatkan larutan asid amino terlindung yang diaktifkan, yang diketepikan.

 

Ambil 0.5 mmol resin amino (darjah penggantian 0.42 mmol/g), bengkak dengan larutan DMF selama 60 minit, nyahlindungnya dengan larutan 20% Pip/DMF selama 30 minit, basuh dan tapis untuk mendapatkan resin yang akan bertindak balas.

 

Tambahkan larutan asid amino terlindung pertama yang diaktifkan pada resin yang akan bertindak balas, jalankan tindak balas gandingan pada 25~35 ℃ selama 120~300 minit, tapis dan basuh untuk mendapatkan resin yang mengandungi 1 asid amino terlindung: Fmoc-Pro-Resin

 

Menggunakan kaedah yang sama seperti di atas, akses secara berurutan asid amino atau serpihan terlindung ke-2 hingga ke-38 yang sepadan yang disebutkan di atas:Fmoc- Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-His(Trt)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Ala-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Saya,Saya)pro)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Saya,Saya)pro)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu-OtBu，Mono-tert-butil eicosanedioate, menghasilkan 4.98 g resin peptida karmegliptin

 

(2)Penyediaan minyak mentahCagrilintide peptida linear

Ambil 4.49 g resin peptida carfilzomib, tambah larutan campuran TFA, nisbah larutan campuran ialah TFA:EDT/Tis/phenol/H₂O = 87.5:2.5:5:2.5:2.5, dan dosnya ialah 8 ml per gram resin; kacau tindak balas pada suhu 20~30°C selama 3 jam, tapis campuran tindak balas dengan corong teras pasir, kumpulkan turasan, cuci resin dengan sedikit TFA 3 kali, gabungkan turasan, tambah MTBE untuk pemendakan, basuh mendakan dengan MTBE 3 kali, dan pam kering untuk mendapatkan serbuk putih pudar, iaitu 2. crubzo.peptida peptida.

 

(3)Penyediaan larutan peptida kitaran Cagrilintide mentah

Ambil 0.50 g linear mentahCpeptida agrilintide, sediakan larutan peptida linear kasar pada kepekatan 5.0 mg/ml, tambahkan 5 ml larutan DMSO titis demi setitik di bawah kacau, dan bertindak balas pada 20~30 ℃ selama 20 jam untuk mendapatkan larutan peptida cagrilintide kitaran mentah.

 

(4)Penyediaan ditapisCpeptida agrilintide

Ambil minyak mentahClarutan peptida kitaran arraglitide, dan tapis dengan membran penapis mikroporous campuran 0.45μm；

 

Tulen dan sediakan menggunakan kromatografi cecair berprestasi tinggi, dan kumpulkanCpecahan arragliptin；

 

Kromatografi cecair berprestasi tinggi digunakan untuk pertukaran penimbal. Puncak utama selepas pertukaran penimbal dikumpulkan dan ketulenannya dikesan oleh kromatografi cecair analitik. Penyelesaian puncak utama selepas pertukaran penimbal telah digabungkan, tertumpu di bawah tekanan yang dikurangkan untuk mendapatkan larutan asid asetik berair karbotida, yang dikeringkan beku untuk mendapatkan 152.18 mg karbotida ditapis dengan ketulenan 99.58%, kekotoran tunggal maksimum 0.09%, jumlah hasil molekul 7, 3 dan18% berat. 4409.0

 

HPLC gambar rajah

 

Rajah MS

 

Contoh di atas menunjukkan bahawa, berbanding dengan proses sintesis gandingan langkah demi langkah, produk yang diperoleh melalui kaedah yang disediakan oleh ciptaan sekarang mempunyai ketulenan lebih daripada 99.0%, dan setiap kekotoran tunggal adalah kurang daripada 0.1%, yang meningkatkan kualiti produk dan jumlah hasil. Proses ini mudah dan mudah dikawal, mempunyai tahap perindustrian yang tinggi, dan mempunyai nilai praktikal yang luas dan prospek aplikasi.

Hubungi Kami

---

Mencari Cagrilintide untuk program anda? Cosperpharm ialah rakan kongsi anda yang dipercayai untuk standard perantaraan dan kekotoran. Hubungi hari ini—kami bersedia untuk menyokong projek anda daripada R&D melalui pengeluaran komersial.

 

Telefon: +86-18986204913

 

Tel: +86-027-83338163

 

E-Mel: info@cosperpharma.com